懸浮細胞的處理方法;奧陸生物 |
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上海奧陸生物科技有限公司 懸浮細胞處理方法 細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。 將細胞懸液移入離心管,1000rpm/min 離心5分鐘。上清培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用。離心下來的細胞T25瓶中加培養液6-8ml,混勻后放入37℃、5%CO2孵箱培養。 傳代方法: 細胞生長至1X106/ml時(一般情況),將細胞懸液移入離心管800-1000rpm/min離心5分鐘,然后棄上清,加新鮮培養液混勻,1瓶分成3瓶(或6瓶-10瓶),每T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養
該細胞使用培養基:1、DMEM(高糖) 2、R1640 3、R1640(改良) 4、MEM(EBSS) 5、MEM(NEAA) 6、D/F12 7、F12 8、F12K 9、MaCcoy‘ 10、L15 血清要求:1、20%FBS 2、15%FBS 3、10%FBS 4、5%FBS 5、2.5%FBS 6、15%HS 7、10%HS 8、5%HS 9、2.5%HS 10、10%CCF(滅活) 凍存液:常規培養液+20%FBS+8%DMSO |